- 品牌:北京伊莱瑞生物科技有限公司
- 产地:中国北京
- 型号:T25/瓶
- 货号:YX-10109
- 价格: ¥1580/瓶
- 发布日期: 2022-07-19
- 更新日期: 2024-10-18
产地 | 中国北京 |
保存条件 | 保存培养温度37℃ |
品牌 | 北京伊莱瑞生物科技有限公司 |
货号 | YX-10109 |
用途 | 科学研究 |
组织来源 | 人 |
细胞形态 | 正常 |
是否是肿瘤细胞 | 是 |
CAS编号 | |
保质期 | |
器官来源 | 细胞库 |
免疫类型 | |
品系 | |
生长状态 | 贴壁生长 |
物种来源 | |
包装规格 | T25/瓶 |
纯度 | 99% |
是否进口 | 否 |
细胞产品详情:
一、细胞基本属性 |
|
细胞名称 |
人胚肾细胞 |
产品英文代号 |
HEK-293(293) |
细胞种属 |
人 |
生长状态 |
贴壁生长 |
培养条件 |
MEM+10%FBS+1%P/S |
产品规格 |
1×10^6cells/瓶 |
单位 |
T25/瓶 |
是否提供细胞STR鉴定报告 |
是 |
二、细胞培养操作 |
|
换液周期 |
2-3天 |
培养基体积 |
T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 |
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 |
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;4.将培养瓶放入37度培养箱消化;5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 |
不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、细胞冻存操作 |
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冻存液配方 |
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 |
200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 |
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,DI二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,Di二天转入液氮保存 |
注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
北京伊莱瑞生物科技有限公司专注于产品的研究、生产、销售和服务。我们拥有一套完整的研发、生产、质检、销售和运营团队;已完成从细胞辅助器材、细胞产品到细胞相关专业化服务的全细胞产业链发展布局;具备制造细胞产品、相关试剂及代做细胞实验的系统化专业能力。
公司秉承“诚信为本,服务至上”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!
公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。
贴壁细胞传代培养:
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基。
2. 加入1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例:建议 1:6 至 1:9
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
悬浮细胞传代培养:
悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成,具体做法如下:
1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1×106 cells/mL 时,进行细胞传代培养。
2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中,将细胞密度维持在2-3×105cells/mL。
3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。
培养基换液: 每隔2至3天。
注意:培养瓶应使用带滤膜瓶盖以保持培养基与空气和CO2
拆包 & 存储:
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代
注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养
培养瓶中细胞操作步骤:
对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁培养的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8mL左右,随后将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温 培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。
3. 对于悬浮培养的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤:
注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
细胞产品的售后政策:
1、收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染,72小时检测支原体阳性无条件重发;
2、享有1个月的超长售后免责期;
3、1个月内,如果第三方鉴定STR错误,可退细胞款项。
4. 细胞运输途中遭遇的问题:丢件、瓶身破损、培养液渗漏;
5. 细胞污染问题,请在收到产品24小时内,给我们提供真实有效实验结果,供核实;
6. 常温发货的细胞经过24小时静置后,有大部分细胞未存活(需提供真实、清晰的细胞状态照片)
7. 干冰冻存管发货的细胞复苏之后,有大部分细胞未存活(需提供真实、清晰的细胞状态照片);
本产品仅供科研使用.请勿用于医药,不能用于临床诊断使用!